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內質網自噬（ER-phagy）指內質網性能發生改變時，細胞激活選擇性自噬清除受損的內質網、內質網膜或蛋白的過程，以維持細胞內的環境穩態。內質網是真核細胞中的一種多性能細胞器，在蛋白質折叠、修飾、脂質和激素合成、離子儲存、代謝調節等多種細胞過程中發揮重要作用。但當細胞受到內外因素刺激時，未折叠或錯誤折叠的蛋白質在內質網中大量積累，內質網的穩態會受到破壞。此時，細胞會啟動自我保護程序，即未折叠蛋白反應（unfolded protein response，UPR），加速內質網相關蛋白降解（ER-associated protein degradation，ERAD）。持續地內質網應激和未折叠蛋白反應可激活內質網自噬，以維持內質網的穩態平衡。內質網自噬和人類多種疾病相關，如神經退行性疾病、癌癥和代謝性疾病等。因此，建立高效的內質網自噬活性監測工具對於闡明內質網自噬的分子機製、生理和病理作用以及尋找調節內質網自噬的藥物具有重要意義。
您可以前往幹貨文章《內質網自噬研究》，察看另外內質網自噬研究情形：包括內質網自噬過程、內質網自噬受體、內質網自噬監測方法及應用實例。
工具 | 性能展現 | 供應商品 |
|---|---|---|
| mCherry-EGFP-RAMP4 | 內質網自噬 | 慢病毒、腺病毒、腺相關病毒 |
| mCherry-RAMP4 | ||
| ssmRFP1-EGFP-KDEL |
1）mCherry-EGFP-RAMP4和ssmRFP1-EGFP-KDEL病毒工具
在細胞質中，紅色和綠色荧光蛋白同時表達，為黃色；若發生內質網自噬，在溶酶體中，由於其偏酸性的環境，綠色荧光蛋白淬滅，只剩紅色荧光信號。可通過分析紅色荧光斑點數來監測內質網自噬。
PMID:30143524（mCherry-EGFP-RAMP4工具）
PMID: 31006538（ssmRFP1-EGFP-KDEL工具）
此外，在溶酶體中，ssmRFP1-EGFP-KDEL工具中的mRFP1與EGFP間的linker會被剪切，也可通過Western Blot結果分析mRFP1/mRFP1-EGFP比值來指示內質網自噬。
PMID: 31006538（ssmRFP1-EGFP-KDEL工具）
2）mCherry-RAMP4病毒工具：
在細胞質中，融合蛋白mCherry-RAMP4表達；若發生內質網自噬，融合蛋白會被水解酶切割，產生遊離的mCherry，結合Western Blot結果分析mCherry與mCherry-RAMP4條帶強度的比值mCherry/mCherry-RAMP4來指示內質網自噬。
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