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慢病毒包裝

Lentivirus Packaging
慢病毒(Lentivirus)載體是以 HIV-1 (人類免疫缺陷1型病毒)為基礎擴展起來的基因治療載體。具有感染譜廣泛、可以有效感染分裂期和靜止期細胞、長期穩定表達外源基因等優點,因此成為導入外源基因的有力工具。現在慢病毒系統已經被廣泛應用到各種細胞系的基因過表達、RNA幹擾、microRNA研究以及活體動物實驗中。
慢病毒特點
感染範圍廣
慢病毒可有效感染分裂和非分裂細胞,適合幾乎所有細胞系,如神經元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內皮細胞、幹細胞等。
可穩定表達
慢病毒可將外源基因整合到宿主細胞基因組上,不隨着細胞的分裂傳代而丟失,可達成目的基因的長時間穩定表達。
操作安全性高
慢病毒采用的是自失活復製缺陷型病毒株,保障操作安全。
慢病毒商品與效勞
效勞類型 供應商品 滴度 適用範圍
常規基因過表達/幹擾慢病毒
miRNA sponge/antago慢病毒
circRNA /LncRNA過表達和幹擾慢病毒
CRISPR/Cas9慢病毒定製
慢病毒現貨
常規滴度慢病毒 108TU/ml 適用於普通細胞系感染
高滴度慢病毒 109TU/ml 適用於難轉染細胞系,如懸浮細胞;或用於動物活體水平感染

效勞流程
慢病毒包裝效勞流程



品質標準
檢測項目 檢測方法 檢測結果
支原體 PCR 陰性
內毒素 LAL 合格
細菌 培養法 陰性
真菌 培養法 陰性
活性滴度 感染法 ≥10^8 TU/ml
載體選擇(常用)
編號 調控方式 元件順序 原核抗性 真核抗性 荧光標記 啟動子
LV005 過表達 pHBLV-CMV-MCS-EF1-mCherry-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin mCherry CMV
LV006 過表達 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-mCherry-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin mCherry CMV
LV007 過表達 pHBLV-CMV-MCS-EF1-Puromycin Ampicillin Puromycin CMV
LV008 過表達 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-Puromycin Ampicillin Puromycin CMV
LV011 過表達 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-ZsGreen-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin ZsGreen CMV
LV012 過表達 pHBLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin ZsGreen CMV
LV052 過表達 pHBLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen Ampicillin ZsGreen CMV
LV05 過表達 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-ZsGreen Ampicillin ZsGreen CMV
LV081 過表達 pHBLV-EF1-MCS-CMV-Puromycin Ampicillin Puromycin EF1
LV082 過表達 pHBLV-EF1-MCS-CMV-ZsGreen Ampicillin ZsGreen EF1
LV083 過表達 pHBLV-EF1-MCS-CMV-ZsGreen-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin ZsGreen EF1
LV121 過表達 pHBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-Luc-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin Luciferase CMV
LV122 過表達 pHBLV-CMV-MCS-EF1-Luc-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin Luciferase CMV
LV027 過表達teton pHBLV-TetOn-SV40-Puromycin-TRE3GS-MCS Ampicillin Puromycin TRE3GS
LV019 幹擾 pHBLV-U6-MCS-PGK-Puromycin Ampicillin Puromycin U6
LV020 幹擾 pHBLV-U6-MCS-CMV-ZsGreen Ampicillin ZsGreen U6
LV021 幹擾 pHBLV-U6-MCS-CMV-ZsGreen-PGK-Puromycin Ampicillin Puromycin ZsGreen U6
LV051 幹擾 pHBLV-U6-MCS-EF1-mCherry-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin mCherry U6
LV124 幹擾 pHBLV-U6-MCS-EF1-Luc-T2A-Puromycin Ampicillin Puromycin Luciferase U6
LV144 幹擾 PHBLV-U6-MCS-CMV-mCherry Ampicillin mCherry U6
LV050 cas9/gRNA pHBLV-U6-gRNA-EF1-CAS9-Puromycin Ampicillin Puromycin U6
LV055 cas9/gRNA pHBLV-U6-gRNA-EF1-ZsGreen Ampicillin ZsGreen U6
LV133 cas9/gRNA pHBLV-U6-gRNA-EF1-ZsGreen-Luc Ampicillin Luciferase U6
常見問題
質粒載體和慢病毒載體的區別?如何選擇?

質粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區DNA原有的能夠自主復製的較小的DNA分子;慢病毒載體,指以人類免疫缺陷病毒-1 (H IV-1) 來源的一種病毒基因治療載體,它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。它們進入細胞的方式不一樣,一般來說質粒在轉染試劑的輔助下轉染進入細胞,慢病毒則是直接感染細胞。

在選擇質粒還是慢病毒,需要考慮實驗周期、實驗預算、目的基因片段大小、是否需要穩定轉染等因素。

質粒相對於慢病毒,成本較低,實驗周期較短,載體容量大;但轉染效率通常遠不及病毒感染效率,並且質粒整合基因組概率極低,如需構建穩定細胞株,選擇慢病毒更為合適。

詳細可參考:基因調控工具選擇指南>>

慢病毒載體和腺病毒載體,該怎麽選?

主要根據實驗目的不同來選擇,可以參考以下幾個方面來判斷:

1) 插入目的序列的大小:慢病毒載體包裝容量一體建議在3k以內,超過可能會影響病毒滴度;腺病毒包裝容量可達8k;若目的序列大小超過載體容量,滴度則會隨着目的序列大小增加而降低;

2) 是否需要構建穩轉細胞株:慢病毒載體可以將外源基因隨機整合到目的細胞基因組中並穩定遺傳,即可用於構建穩轉細胞株,當然做瞬時轉染也可以;而腺病毒不整合基因組,只適用於瞬時轉染;

3) 目的細胞類型:像神經細胞、一些原代細胞等感染難度比較大的細胞,且後續無需建立穩轉株,推選使用腺病毒,其感染效率要遠高於慢病毒。

 詳細可參考:基因調控工具選擇指南>>

漢恒生物的慢病毒包裝系統是什麽?

漢恒生物的慢病毒包裝系統以三質粒系統為主,組成為psPAX2, pMD2.G, pHBLV系列質粒。

如需其他包裝系統,可咨詢客服。

慢病毒現貨和其他慢病毒包裝效勞的區別?

漢恒生物的慢病毒現貨商品是指已構建好的慢病毒商品,省去了基因合成,慢病毒質粒構建等步驟。

相對於其他慢病毒商品,慢病毒現貨到貨周期更快。

您可以在小恒基因商城輸入您的基因名、基因ID或是NM號進行查詢。

慢病毒感染實例


顧客發表文獻節選
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